以差異性膜蛋白質體學技術探討肺癌惡性轉移相關蛋白質
Differential membrane proteomics on lung cancer metastasis-associated proteins
The molecular mechanism of metastasis remains largely unknown presently. Fucosylation is highly involved in invasion, metastasis, and poor prognosis in several types of cancers. In the present study, A549 lung cancer cells with highly (A549F) and poorly (A549M) metastatic ability were used to identify lung cancer metastasis-related proteins. The A549F was created by overexpression of a-1,3-fucosyltransferase IV (FUT4) in A549 cells. The potent migration and adhesion power verified metastatic phenotypes in A549F cells. The detergent-based extraction achieved membrane protein lineage. The 2D fluorescent differential gel electrophoresis (DIGE) approach was selected to overview the global membrane proteome change. The significantly up-regulated proteins in highly metastatic A549F cell were related to the angiogenesis and metastasis-associated galectin-1 (Gal-1), the molecular chaperon, heat-shock protein 27 kD (HSPB1), and the stress-related protein, peroxiredoxin-1 (PRDX-1). All proteins were validated by western blots and indicated a good correlation to DIGE. In the protein network associated with Gal-1, HSPB1, and PRDX-1 implied that p53 and cMyc might play an important role in regulating these proteins and possibly modulating cancer metastasis progressions. This study can therefore assist in defining the membrane proteome changes that occur in FUT4 overexpressed A549 cells, and provide molecular explanations or targets for treating lung cancer metastasis.

 
以差異性蛋白質體學分析PMA和A23187對人類嗜鹼性白血球細胞之影響
Comparative proteomics on resting and activated human basophilic leukemic KU812 upon stimulation with PMA plus A23187
人類嗜鹼性白血球細胞對過敏和免疫調節作用在近年來逐漸受到重視。本研究利用免疫促進劑 (PMA和A23187) 去刺激人類嗜鹼性白血球細胞，觀察活化前後其細胞內所有蛋白質之變化，並採用二維電泳，配合介質輔助雷射脫附離子化四極棒式飛行時間分析儀 (MALDI-Q-TOF) 和蛋白質比對軟體，來進行差異性蛋白質體分析。實驗結果發現經PMA和A23187處理後，嗜鹼性白血球細胞會大量產生第二型 (Th2) 細胞激素如介白素4, 5, 13 (IL-4, IL-5, IL-13)，使反應趨向於過敏方向，並同時鑑定到2個正向調節和15個負向調節蛋白質。進一步以蛋白質轉漬法分析異質核醣核蛋白K (HNRPK) 和烯醇酶 (ENO1) 的產量，發現與二維電泳上蛋白質的表現量趨勢相吻合。這些蛋白質主要存在於細胞質、細胞核和細胞質膜。經生物資訊軟體分析比對後，這群蛋白質大部分和免疫、過敏失調和癌症形成有關。

 以蛋白質生物技術鑑定生鮮河魨和其加工品之來源魚種
Protein techniques in identification of raw and processed puffer fish species
此部分計畫主要使用蛋白質電泳技術如SDS-PAGE、native-IEF和IPG-2DE去分離鑑定生鮮和加工之河魨魚種與DNA技術去鑑定mitochondrial cytochrome b gene。其中水溶性、鹽溶性、SDS可溶性和尿素可溶性蛋白質皆可有效地應用於生鮮魚種鑑定，且主要的種別特異性蛋白質分佈於酸性小分子量蛋白質(pI 3-5, Mw 10-30 kD)。在SDS-PAGE分析上，以SDS可溶性和尿素可溶性蛋白質搭配複染(silver-Coomassie blue staining)及蛋白質密度分析，最適合用來鑑定河魨魚種；以尿素可溶性蛋白質搭配銀染和PCR增幅鑑定mitochondrial cytochrome b gene可用來鑑定加工過之河魨香魚片。以native-IEF分析水溶性蛋白質，包含酸性、中性和鹼性蛋白質區間皆可鑑定魚種，是個快速且有效的技術。以IPG-2DE技術雖耗時但相反地得到最多蛋白質成分，搭配Coomassie blue染色約有170-260個蛋白質組成，在酸性小分子量蛋白質區間可輕易地辨識所有測試之河魨魚種。在這區間，Parvalbumins是屬於熱抗性種別特異性蛋白質，最近亦被發現是主要的魚類過敏原。肌凝蛋白(tropomyosin)不具種別特異性，是河魨及其他魚介貝類主要的蛋白質成分，更被發現是引起介貝類過敏的主因，最近亦有報導此成分在塵蹣與介貝類間的免疫交互作用。

引起魚類食物中毒事件中之旗魚排和鯷魚生物胺檢測和組織胺生產菌株
Biogenic amines and bacterial isolates of marlin and anchovy implicated in food poisoning
此部分計畫主要使用HPLC技術去偵測衍生化的生物胺並以微生物操作技術去分離生產生物胺的相關菌株。檢體分別是台中托兒所引起食物中毒之旗魚排和美國藥物食品管理局(USFDA)回收之anchovy罐頭(在美國進修時參與之研究)。

 
台灣產虎河魨呈味成分之季節性和地域性分布
Taste-active compounds in the muscle of Taiwanese puffer (Takifugu rubripes)
此部分計畫主要探討台灣產虎河魨，亦是日本人最喜愛的河魨魚種之呈味成分包含游離胺基酸、核苷酸、小分子成分等，並推算呈味成分在區域和季節性的變化。同時研究虎河魨死後的生化變化，如pH值、K值、游離胺基酸和蛋白質的死後表現。

大台北地區生鮮魚市場提供之水產品之衛生指標和化學鮮度指標調查
Investigation of hygienic quality and freshness for marketing fresh seafood in northern Taiwan
此部分計畫主要以化學鮮度指標與微生物腐敗指標菌等探討台北和基隆區生鮮、超商、大型量販店和觀光魚市等地之水產品，藉以了解市售水產品的鮮度和衛生品質與水產作業環境的相關衛生安全。

維生素E和大豆異黃酮對卵巢摘除之母鼠引起高膽固醇血症之保護作用
Studies of vitamin E and/or isoflavone on ovariectomy-induced hypercholesterolemia in rats
此部分計畫為在美國進修時參與之研究，主要以卵巢摘除之母鼠為動物模式，模擬更年期婦女停經後引起之高膽固醇、骨質疏鬆症等不適症狀，其中實驗組為分別和同時餵食維生素E和異黃酮不同劑量去探討他們對不適症狀和生理指標之緩解作用。